Karpas-299 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

Karpas-299細(xì)胞專用培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持Karpas-299細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 Karpas-299細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于Karpas-299細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基                      395 mL

特級胎牛血清                                     100 mL

 運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒

Human maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒

Rabbitmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAKit 兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)試劑盒分裝

CLIAKitforai-DNaseB(Humanai-deoxyribonucleaseB)ELISAKit人抗DNA酶B抗體

血液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量試劑盒20次

PorcineHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒 ，英文名： Casp-9 ELISA Kit

Rabbit major histocompatibility complex class I (MHC I and /RLA I) ELISA Kit 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)試劑盒

東方體核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-4(Humanmaixmetalloproteinase4)ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶4

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)

ELISAKitVA犬A

豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶2(Tie-2)ELISAKit   ELISA. 

豬血管生成素1(ANG-1)ELISAKit   ELISA. 

豬乙酰受體抗體(AChRab)ELISAKit   ELISA. 

豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISAKit   ELISA.

TOM1L2蛋白抗體

血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體

PILRB重組小鼠 PILRB1 蛋白  Protein

半乳糖凝集素9C(GAL9C)重組蛋白 Recombinant Galectin 9C (GAL9C)

MID1IP1重組人 MID1IP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BID Protein Human 重組人 BID 蛋白

DDR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

Karpas-299 細(xì)胞專用培養(yǎng)基半乳糖凝集素9C(GAL9C)重組蛋白 Recombinant Galectin 9C (GAL9C)

BID Protein Human 重組人 BID 蛋白

PILRB重組小鼠 PILRB1 蛋白  Protein

DDR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

MID1IP1重組人 MID1IP1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測。