細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

Ham's F-12K培養(yǎng)基是一種基于Ham's F-12培養(yǎng)基改進而來的混合營養(yǎng)體系。Ham's F-12K最早是為了培養(yǎng)人原代肝細胞而開發(fā)的，當(dāng)然同時它也適用于在一個低血清環(huán)境下培養(yǎng)鼠和雞等動物來源的干細胞。

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human nephrin (nephrin) ELISA Kit 人蛋白(nephrin)試劑盒

humahyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

humanai-nucleosomeaibodyIgG,AnuA-IgG試劑盒人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量試劑盒20次

HumanUbiquitin,UbELISAKit人泛素蛋白(Ub)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠原肌球蛋白2β(TPM2)試劑盒 ，英文名： TPM2 ELISA Kit

Mouse ovarian cancer marker CA125ELISA Kit 小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125試劑盒

Mousemacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 小鼠巨噬細胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2

細胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒10次

ELISAKitMYO/MB大鼠肌紅蛋白

(Fibrinogen)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

人 Foxp3(Foxp3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

半乳糖凝集素 7 （ Galectin-7 ）   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

胃泌素 (Gasin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體

一氧化氮合成酶-3（內(nèi)皮型）單克隆抗體

IGFBP4重組小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

CK19 細胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 細胞角蛋白19抗原

IDH1重組人 IDH1 蛋白 Protein

HIST2H2BE Protein Human 重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

S100A6 Protein Mouse 重組小鼠 S100A6 蛋白

F12K 培養(yǎng)基Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)

ICAM5 Protein Human 重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein

HRG Protein Human 重組人 HPRG / HRG 蛋白

IL7R重組人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein