細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞的培養(yǎng)。

內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

內(nèi)皮細胞基礎培養(yǎng)基                          465 ml

內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑                          5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒

HumanHydrocoisone,HYDELISAKit 人輕化1(HYD)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanComplemefragme5b,C5b試劑盒人補體片斷5b(C5b)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CDK3/CYCLINE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)試劑盒 ，英文名： VEGFR3 ELISA Kit

Mouse hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 小鼠輕化1(HYD)試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanBetacatenin,Beta-CatELISAKit人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白

細胞D-乳酸比色法定量試劑盒20次

ELISAKiesistin大鼠抵抗素

小鼠紅細胞生成素受體(mouse EPOR)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(mouse ECP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

少突膠質(zhì)細胞髓鞘相關蛋白抗體

6號染色體開放閱讀框186抗體

ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

血紅素氧合酶1(HO1)重組蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD7 Protein Human 重組人 CD7 蛋白

GP120 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, su屬

大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基Fibulin 1 衰老關鍵蛋白抗原 0.5mgFibulin 1 衰老關鍵蛋白抗原

GPR114 Protein Human 重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標簽)

GGT1重組大鼠 GGT1 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Mouse 重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

HSF1重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白 Protein