細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

雞腎小管上皮細胞永生化細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持雞腎小管上皮細胞永生化細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含雞腎小管上皮細胞永生化細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于雞腎小管上皮細胞永生化細胞的培養(yǎng)。

上皮細胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

上皮細胞基礎培養(yǎng)基                     440 ml  

上皮細胞培養(yǎng)添加劑                     5 ml 

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)試劑盒 96T/48T

Human aldosterone (ALD) ELISA Kit 人固酮(ALD)試劑盒

Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAndrogenBindingProtein,ABP試劑盒人雄激素結合蛋白(ABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量試劑盒20次

MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit猴載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠細胞周期素D1(CCND1)試劑盒 ，英文名： CCND1 ELISA Kit

Mouse three iodothyronine (T3) ELISA Kit 小鼠三甲狀腺原(T3)試劑盒

MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 小鼠S100蛋白(S-100)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSVII-Ab(HumanHerpessimplexvirusIIaibody)ELISAKit人單皰疹病毒Ⅱ型抗體

細胞IKKβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitLTE4大鼠白三烯E4

胃泌素   英文名稱：   Gasin   規(guī)格：      英文縮寫：   G

心肌轉錄因子GATA3   英文名稱：   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格：      英文縮寫：   GATA3

心肌轉錄因子GATA4   英文名稱：   cardiac muscle anscription factor GATA4   規(guī)格：      英文縮寫：   GATA4

粒細胞趨化蛋白-2   英文名稱：   neuophilicgranulocyte chemokines Protein 2   規(guī)格：      英文縮寫：   GCP-2

細胞分化蛋白SEPT10抗體

FAM90A27P抗體

EPCAM重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白  Protein

Gentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 慶大偶聯(lián)雞卵白蛋白

SPEG重組人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 標簽) Protein

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

ECM1 Protein Mouse 重組小鼠 ECM1 蛋白 (His 標簽)

雞腎小管上皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基血管性血友病因子(vWF)重組蛋白 Recombinant Von Willebrand Factor (vWF)

CD74 Protein Human 重組人 CD74 蛋白

LEFTY2重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GAG-P24 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein