人甲狀旁腺細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

人甲狀旁腺細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人甲狀旁腺細(xì)胞永生化細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人甲狀旁腺細(xì)胞永生化 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人甲狀旁腺細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)。

上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                     440 ml     

上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑                     5 ml  

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit 人葡萄球菌蛋白A(SPA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠ試劑盒人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit人γ谷氨酰半胱合成酶(γ-ECS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2(SOCS2)試劑盒 ，英文名： SOCS2 ELISA Kit

Mouse epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 小鼠上皮粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒

MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 進(jìn)口分裝

HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(捕獲法一步法)

細(xì)胞IRAK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitLTB4大鼠白三烯B4

小鼠骨鈣素   英文名稱：   Osteocalcin   規(guī)格：      英文縮寫：   OC

小鼠抑瘤素   英文名稱：    M   規(guī)格：      英文縮寫：   OSM

小鼠催產(chǎn)素   英文名稱：   Oxytocin   規(guī)格：      英文縮寫：   OT

小鼠骨保護(hù)素配體   英文名稱：   Osteoprotegerin ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   OPGL

細(xì)胞角蛋白15抗體

FGF4單克隆抗體

HGFA重組人 HGFA 蛋白 Protein

神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)重組蛋白 Recombinant Neuronal Pentraxin II (NPTX2)

CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein

ICOS Protein Human 重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H15N8 重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hem屬

人甲狀旁腺細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原

CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein

TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測。